Eine Extinktion von zwei heißt, ein Prozent des Lichts kommt durch

Verdünnen, bis der Wert zwischen 0,1 und 1 liegt

Bei A = 3 vergleicht der Detektor einen Strahl mit einem Tausendstel seiner selbst, und jedes Streulicht, jeder Kratzer auf der Küvette und jedes Staubkorn trägt zum Rest mehr bei als die Probe. Bei A = 0,05 tritt das umgekehrte Problem auf: Der Unterschied zwischen Probe und Blindwert ist kleiner als die Eigendrift des Geräts. Das nutzbare Band dazwischen ist der Bereich, in dem ein Spektralphotometer sein Geld verdient, und hineinzukommen ist eine Frage von Verdünnung oder Küvette — 1 mm Schichtdicke statt 10 teilt den Messwert durch zehn, ohne die Probe anzurühren: die schnellste Lösung, wenn Material knapp ist.

Der Extinktionskoeffizient gehört zu einem Stoff bei einer Wellenlänge

Er ist keine Eigenschaft des Geräts oder der Küvette: Er ist eine Zahl für einen Stoff, gemessen bei einer Wellenlänge in einem Lösungsmittel, und jede dieser drei Änderungen ändert ihn. Einen Extinktionskoeffizienten ohne Wellenlänge zu nennen ist wie eine Geschwindigkeit ohne Richtung — die Zahl ist echt, der Satz unvollständig. Deshalb wird ein Spektralphotometer vor jeder Messung auf eine bestimmte Wellenlänge eingestellt, meist auf das Absorptionsmaximum des Stoffs, wo der Wert am größten und gegen eine leichte Dejustage am unempfindlichsten ist. Eine Verschiebung von wenigen Nanometern nahe einer steilen Flanke des Spektrums kann die Antwort stärker verschieben als der gesamte Verdünnungsfehler.

Häufige Fragen

Wozu dient der Blindwert wirklich?

Um alles abzuziehen, was nicht das Gemessene ist. Das Lösungsmittel absorbiert ein wenig, die Küvettenwände spiegeln ein wenig, und die Lampe leuchtet nicht bei jeder Wellenlänge gleich hell; das Nullen an einer Küvette mit allem außer dem Analyten entfernt alle drei in einem Schritt. Ein Blindwert aus einer anderen Lösungsmittelcharge oder in einer anderen Küvette als die Probe führt still wieder ein, was er beseitigen sollte — deshalb gibt es gepaarte Küvetten, und deshalb wird der Blindwert bei jedem Wellenlängenwechsel neu gemessen.

Warum versagt das Gesetz bei hoher Konzentration?

Aus zwei Gründen zugleich, einem gerätetechnischen und einem chemischen. Der gerätetechnische ist Streulicht, das jedem Messwert eine Decke setzt: Sobald die wahre Transmission unter das um die Probe herum sickernde Licht fällt, ändert weitere Konzentration nichts mehr. Der chemische ist, dass gedrängte Moleküle aufhören, sich unabhängig zu verhalten — sie wechselwirken, lagern sich zusammen, verschieben einander die Absorption —, sodass der bei mikromolaren Konzentrationen konstante Koeffizient bei millimolaren nicht mehr derselbe ist. Beides biegt die Kalibrierkurve nach unten; deshalb nimmt man eine Standardreihe über den tatsächlich genutzten Bereich auf, statt aus einem Punkt zu extrapolieren.